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小鼠郁闷行为试验之缓慢社会挫折模型的树立及检测办法

2024-03-12 02:28:18
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  该部分试验内容是参照了有关文献。首要依据需求选取少量的CD 1小鼠作为进犯性小鼠,在正式试验前2-3周开端对其进犯性进行挑选。详细办法便是:每个养殖笼中养殖雄性和雌性两只周龄附近的CD1小鼠,一段时刻内让CD1雄性小鼠发生领地认识;1周今后,将配对养殖的雌鼠别离出养殖笼,随机放入一只生疏的C57小鼠作为领地入侵者,假如CD1雄性小鼠在1 min之内就开端对C57小鼠发起进犯,那么该CD1小鼠则被视为进犯性CD1小鼠。运用相同的办法挑选出一切需求的进犯性雄性CD1小鼠。正式试验前,选取雄性C57小鼠(7周),随机分配成正常组和应激组,每组10只,对照组每2只一笼,其他均单笼养殖,给正常饮食饮水一周充沛习惯环境。当试验开端时,提早别离CD1雌鼠,取模型组C57小鼠一只,直接放入生疏雄性CD1小鼠(8-9周)养殖笼中,使C57小鼠遭受雄性CD1小鼠继续性进犯约5-10 min;然后将两只小鼠用带有密布小孔的通明塑料隔板离隔,使两只小鼠互相仍能互视和闻嗅可是无法触摸,运用这种办法继续到下次进行进犯前停止,完结该进程后即为第一天应激。第二天再将该C57鼠放入另一不同的CD1雄性鼠的笼中,使C57小鼠遭到相同程度的应激;第三天再放入第三只CD1雄性鼠的笼中,相同使C57小鼠遭到相同程度的应激。如此接连应激10天,并确保每天同一只C57小鼠遭到不同CD1雄性鼠的进犯。在此期间,对照组和应激组C57小鼠均坚持正常饮食饮水,而对照组则坚持2只一笼,每天彼此替换触摸不同的小鼠。

  10天接连应激完毕后即开端行为学测验。依据糖水耗费,社会触摸的行为学和悬尾测验的成果将C57小鼠分为正常组,郁闷灵敏组,郁闷非灵敏组。

  糖水偏好测验是检测郁闷症快感缺失的经典办法。测验前用自来水制造好1%蔗糖水,与不含蔗糖的正常自来水一起放在C57模型鼠的鼠笼处,确保其自在饮用,一起供给足够的鼠食,每12h将糖水和白水交换方位,以避免C57模型鼠发生方位偏好。到第三天将一切的水和食物一起撤走,将C57模型鼠禁食24 h。禁食完毕后别离称量糖水和白水的分量并记载,然后将两瓶水随机放在养殖笼上供模型鼠自在饮用,1h后取下两瓶水别离丈量两瓶水剩余的分量,计算出糖水耗费分量A和白水耗费分量B,使用公式A/(A+B) X 100%即得到CSDS模型鼠的糖水偏好率。糖水偏好率的值与动物的快感程度呈正相关,其值越小则标明动物快感缺失越严峻。

  该试验办法大多数都用在检测小鼠对生疏方针的接近,探究和躲避行为。正常的啮齿类动物是社会性动物,当正常鼠与生疏鼠相遇后会与生疏鼠频频触摸;而遭受过社会挫折应激的小鼠则会发生孤立和躲避触摸的行为,该行为一般判定为郁闷样行为;而相比之下,在必定的时刻内,正常鼠在单位时刻内与正常鼠触摸的时刻显着善于模型鼠在单位时刻内与正常鼠触摸的时刻,因而,在规则时刻内计算出模型鼠与进犯鼠触摸的时刻能反应出模型鼠的郁闷程度。其详细操作办法是:在敞箱(45 X 45 X 45 cm)一侧的中心放入隔板(10 x 6 cm,底部有密布小孔,用来放置生疏CD1小鼠),以中心放置CD1小鼠的区域为中心,划出一矩形区域作为触摸区域(14 x 26 cm ) }46}。成果经过由上海欣软信息科技有限公司公司供给的VisuTrack软件进行触摸时刻的计算。整个试验过程如下:

  (2)不放入生疏的CD1小鼠,然后放入C57小鼠,然后开端计时,时刻设定为2.5 min

  最终得到触摸区和非触摸区的累积时刻,此阶段为Target absent;

  (3)放入生疏的CD1小鼠,然后放入C57小鼠,然后开端计时,时刻设定为2.5 min

  最终得到触摸区和非触摸区的累积时刻,此阶段为Target present;

  absent阶段,对照组和模型鼠无显着差异,可是在Target present阶段,模型鼠的

  将高60 cm的架子放置于安静的试验环境中,用夹子夹住小鼠尾巴结尾1 cm处,然后将夹子固定在架子上,使其倒吊于架子上,小鼠为战胜不正常而挣扎活动,在此期间记载小鼠的不动时刻。一共时刻为6 min,开端1 min为习惯时刻,随后5 min为记载时刻。

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